Należy zauważyć, że dożylne wstrzyknięcie limfocytów T CD8 + myszom z chorobą myszy nie otrzymujących napromieniowanego Ly5.1 + CD45.1 + było wystarczające do fenotypowej rekapitulacji pierwotnej choroby, identyfikując komórki T CD8 + jako złośliwą pulę komórek (Figura 5, E. G i Dodatek Figura 5, C i D). Figura 5hSTAT5BN642H Komórki T CD8 + są komórkami inicjującymi rak. (A) Procent przeżycia wolnego od choroby po całkowitym BMT hSTAT5BN642H u 8-tygodniowych myszy otrzymujących NSG w porównaniu z BMT WT. (B) Makroskopowy widok LN i śledziony od myszy biorcy BMT hSTAT5BN642H w porównaniu z myszą biorcą BMT WT. Pasek skali: cm. (C) Analiza cytometrii przepływowej pokazuje ilość komórek CD3 + i stosunek limfocytów T CD8 / CD4 w śledzionach myszy biorących BMT. (D) Analiza histologiczna komórek CD3 + z płuc myszy otrzymujących NSG po hSTAT5BN642H lub BMT WT. Pasek skali: 100 .m. Oryginalne powiększenie, × 20 i × 40 (wypustki). (E) Procent przeżycia wolnego od choroby po przeszczepieniu komórek hSTAT5BN642H lub WT CD8 + do nie otrzymujących napromieniowanych 8-tygodniowych myszy biorców Ly5.1 / CD45.1. (F) Analiza cytometrii przepływowej pokazuje ilość śledzionowych komórek CD3 + CD8 + w myszach z przeszczepionymi limfocytami T CD8 +. (G) śledziona i stosunek BW myszy Ly5.1 / CD45.1 z przeszczepionymi T i hSTAT5BN642H CD8 + T z przeszczepionymi limfocytami T. (ACY) n = 4 myszy WT i n = 5 myszy hSTAT5BN642H; (EaG) n = 6 myszy WT i n = 5 myszy hSTAT5BN642H. Dane reprezentują średnią. SD. * P <0,05, ** P <0,01 i *** P <0,001, przez niesparowany, dwustronny test Studenta. Inhibitory JAK tłumią progresję choroby w modelu choroby sterowanej hSTAT5BN642H. Zaproponowano wiele schematów leczenia białaczek i chłoniaków z mutacją hSTAT5BN642H. Istnieje jednak ograniczona wiedza na temat skuteczności tych terapii, częściowo z powodu braku odpowiedniego przedklinicznego modelu (17, 18). Zazwyczaj STAT5 jest aktywowany w odpowiedzi na przekazywanie sygnału przez cytokiny, a komórki niosące mutanta hSTAT5BN642H wykazują przedłużone poziomy pY-STAT5 po stymulacji, zamiast być konstytutywnie aktywne (18). Kiedy analizowaliśmy poziom pY-STAT5 w pierwotnych komórkach T pochodzących z LN WT i myszy transgenicznych hSTAT5B- i hSTAT5BN642H, wykryliśmy drastycznie obniżone poziomy pY-STAT5 jedną godzinę po pozbawieniu IL-2 w WT i ekspresji hSTAT5B. Komórki T. Przeciwnie, niskie poziomy pY-STAT5 pozostawały wykrywalne do 4 godzin po usunięciu IL-2 w komórkach T eksprymujących hSTAT5BN642H (Figura 6A). Stwierdzenie, że cytokiny skutecznie aktywowały hSTAT5BN642H skłoniło nas do przetestowania, czy komórki niosące mutację hSTAT5BN642H są wrażliwe na hamowanie JAK. Zgodnie z oczekiwaniami, zatwierdzone przez FDA inhibitory JAK ruksolitynibu i tofacitinib zmniejszały aktywację STAT5 i żywotności komórek, z wartością IC50 0,11 (M (ruksolitynibu) i 0,12. M (tofacitinib) i porównywalne wartości IC50 dla wszystkich genotypów (Figura 6, B). i C, i dodatkowa Figura 6A). Ponadto badano inne leki zatwierdzone przez FDA, takie jak inhibitory HDAC do leczenia chłoniaka z komórek T (42). Stwierdzono również, że Entinostat i kilka innych leków jest skutecznych w indukowaniu apoptozy w komórkach T, z IC50 w zakresie nanomolowym, ale nie wywierał różnicowego wpływu pomiędzy komórkami wyrażającymi hSTAT5B- i hSTAT5N642H (dodatkowa Figura 6A i Tabela Uzupełniająca 1). Fig. 6 komórki T chorej chore na sterowane HSTAT5BN642H można leczyć inhibitorami JAK. (A) Analiza WB poziomów pY-STAT5 w izolowanych i hodowanych komórkach LN T z myszy hSTAT5BN642H, hSTAT5B i WT po usunięciu IL-2. (B) Krzywa zależności odpowiedzi od dawki od WT, hSTAT5BN642H i limfocytów T hSTAT5B 72 godziny po leczeniu ruksolitynibem, analizowano za pomocą testu CellTiter-Glo (CTG). Wartości IC50 określono przy użyciu GraphPad Prism [podobne: penire plus, revita bielany, gim 143 ]
Comments are closed.
[..] Cytowany fragment: gabinet ginekologiczny warszawa[…]
Najpierw wizyta u lekarza rodzinnego
[..] Cytowany fragment: implanty bielsko[…]
w zależności od stadium mediana przeżyć bywa różna
[..] Cytowany fragment: leczenie kanałowe poznań[…]
Lekarze rodzinni mylą się nie czasem a zazwyczaj