Diagnostyka prenatalna stanu płodowego RhD przez analizę molekularną osocza matki czesc 4

Podmiot 3 nosił płód RhD-ujemny i nie było sygnału wzmacniającego. Wyniki testu PCR RhD dla próbek osocza pobranych od 57 kobiet przedstawiono w Tabeli 1. Reprezentatywne dane dotyczące amplifikacji przedstawiono na rycinie 2. Wśród kobiet, które były w drugim lub trzecim trymestrze ciąży, była całkowita zgodność wyników genotypowanie płodowe genów RhD przy użyciu testu RhD PCR próbek osocza matki i wyniki uzyskane z genotypowania płynu owodniowego lub badania serologicznego krwi pępowinowej. Próbki osocza od dwóch kobiet w pierwszym trymestrze ciąży, które niosły płody RhD-dodatnie, z wiekiem osiem i dziewięć tygodni, dawały fałszywie ujemne wyniki. Wyniki pozostałych 10 kobiet w pierwszym trymestrze ciąży były zgodne: 7 było RhD-dodatnich w teście PCR i miało płody RhD-dodatnie, a 3 były ujemne względem RhD w teście PCR i miały płody ujemne względem RhD. Czterdzieści siedem z 57 pacjentów miało wcześniejsze ciąże.
Jako kontrolę amplifikacji DNA wyekstrahowanego z osocza matki, próbki również poddano testowi PCR p-globiny. Sygnał był dodatni we wszystkich 57 próbkach DNA osocza matki.
Dyskusja
Nasze badanie demonstruje wykonalność płodowego genotypowania RhD przy użyciu DNA wyekstrahowanego z osocza matki. Ten rodzaj analizy powinien być bardzo przydatny w leczeniu uczulonych kobiet z ujemnym poziomem RhD, których partnerzy są heterozygotyczni pod względem genu RhD. Jeśli badanie wykaże, że płód jest ujemny względem RhD, można uspokoić rodziców, że płód nie jest zagrożony. Z drugiej strony, jeśli testy wykażą, że płód jest RhD-dodatni, można zaplanować leczenie. Zaletą tego testu, który analizuje matczyne osocze, jest to, że ani matka, ani płód nie są narażone na ryzyko normalnie związane z amniopunkcja lub próbą kosmówki-kosmówki.17 Dodatkową ważną zaletą tego podejścia jest unikanie dalszego uczulenia immunologicznego, jak wynik krwotoku płodowego po zabiegach inwazyjnych.18,19
Nasze dane sugerują, że wyniki testu PCR RhD są wiarygodne, począwszy od drugiego trymestru. Dostępność takich wczesnych, wiarygodnych wyników daje klinicystom wystarczająco dużo czasu na zaplanowanie dalszych testów lub leczenia, takich jak pobieranie próbek krwi płodowej i transfuzja płodu, 20,21, które zwykle wykonuje się od połowy drugiego trymestru. Wyniki dla dwóch próbek w pierwszym trymestrze były fałszywie ujemne, prawdopodobnie z powodu niskiego stężenia płodowego DNA w osoczu matki w tym czasie.
Ten test może mieć również zastosowanie w rutynowym badaniu niesensowanych ciężarnych kobiet z niewydolnością RhD. Jeśli płód okaże się ujemny względem RhD, można uniknąć niepotrzebnego użycia immunoglobuliny RhD.22
Z dotychczasowych danych wynika, że analiza płodowego DNA w osoczu matki nie wydaje się mieć wpływu na utrzymywanie się komórek płodowych z poprzednich ciąż. 23 Na przykład, nie znaleźliśmy żadnych fałszywie dodatnich wyników w osoczu od kobiet, które były w ciąży wcześniej i którzy nosili płody ujemne względem RhD w obecnej ciąży. To odkrycie jest zgodne z naszymi poprzednimi danymi uzyskanymi przy użyciu testu PCR specyficznego dla chromosomu Y: nie było fałszywie dodatnich wyników u kobiet, które wcześniej były w ciąży z płodem męskim.
Ze względu na wysokie stężenie płodowego DNA w osoczu matki 14 wyniki genotypowania DNA płodu z osocza matki są bardziej wiarygodne niż wyniki uzyskane w wyniku płodowej analizy genetycznej frakcji komórkowej krwi matki.
[więcej w: bimatoprost, noni, anastrozol ]
[hasła pokrewne: dopasuj rysunek do każdej z podanych nierówności, pokrzywka objawy, polipektomia ]